Pregunta:

Visita la página http://www.scienceimaging.se/QG_schema.asp, estudia la animación y contesta:

1. Composición del tampón de lisis: ¿Qué es una sal caotrópica y para qué se usa en este proceso? ¿Qué es un surfactante y para qué se usa en este proceso?
2. Describe el efecto del tampón de lisis sobre el DNA, las proteínas, el RNA, los ribosomas y los lipidos.
3. Describe la etapa de presurización 1, explicando lo que ocurre en la membrana con cada tipo de biomolécula.
4. Describe la etapa de presurización 2. ¿Cuál es su propósito?
5. Describe la etapa de presurización 3.

Respuesta:

1. Caotrópico: Que altera la estructura de macromoléculas, en particular interfiriendo con interacciones no covalentes como fuerzas de van der Waals y efecto hidrófobo.
   Surfactante: (del inglés surfactant, y éste acrónimo de surface, superficie, active, activo, y -ant, -ante).1. m. Tecnol. Sustancia que reduce la tensión superficial de un líquido, y que sirve como agente humectante o detergente. U. t. c. adj. (DRAE)
   Las sales caotrópicas producen la desnaturalización de las proteínas y, en consecuencia, la separación de su unión con los ác. nucleicos (DNA o RNA ribosómico).
   Los surfactantes, o detergentes, disuelven los lípidos de la membrana citoplasmática, lisando las células; también contribuyen a la desnaturalización de las proteínas (estabilizando su forma desplegada por interacción con sus zonas hidrófobas).
2. Como su nombre indica, la acción principal es romper las células, solubilizar los lípidos de su membrana. El DNA y el RNA no se ven afectados, pero las proteínas se desnaturalizan y se separan del DNA (principalmente histonas en los nucleosomas) y del RNA (ribonucleoproteínas, ribosomas).
3. En la presurizacíon 1, la muestra se hace pasar por la membrana o filtro con un disolvente de baja polaridad que permite que las moléculas más polares (DNA y RNA) se adsorban sobre la membrana, al ser ésta más polar que el disolvente. Las fotomicrografías muestran cómo el DNA ha quedado adherido a la membrana. Las proteínas desnaturalizadas y los lípidos son menos polares y se eluyen.
4. En la presurizacíon 2, se lava la membrana en las mismas condiciones, para completar la elución.
5. En la presurizacíon 3, se pasa un disolvente más polar que permite que los ácidos nucleicos se separen de la membrana y eluyan, disueltos.

Comentarios:

• En atención al esfuerzo realizado, se puntúan parcialmente algunas respuestas y más de las 5 previstas.

Observaciones: 9 048 398 y 71 287 995 no tienen ficha, no pueden participar.

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